斐林試劑和班氏試劑的使用方法及原理不盡相同。斐林試劑和班氏試劑都是檢驗還原性糖的試劑,二者的使用方法及原理、成分也有區(qū)別,下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結。
(1)班氏試劑常用于尿糖的鑒定,其配方與斐林試劑不一樣,其配方為:
①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無水tan酸鈉;
②50mL加熱的水中加入8.5g無水硫酸銅。制成溶液;
③把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液中,邊加邊攪,如產生沉淀可濾去。
(2)其反應原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑒定時,斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應生成酒石酸絡銅離子。
酒石酸絡銅離子和可溶性還原糖在加熱條件下反應產生磚紅色沉淀。而班氏試劑中的產生卻是這樣的:檸檬酸鈉作為絡合劑,由碳酸鈉提供堿性。CuSO4與檸檬酸鈉溶液和Na2CO3溶液混合時生成檸檬酸絡銅離子,檸檬酸絡銅離子與葡萄糖中的醛基反應生成磚紅色沉淀。
(3)兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙混合后會因酒石酸有一定的還原性而自發(fā)地緩慢產生氧化亞銅沉淀,因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配;而班氏試劑的配方中,檸檬酸鈉比較穩(wěn)定,實際堿性也不強,不易還原銅離子產生氧化亞銅沉淀,因此該試劑可長期保存。
當然,無論用班氏試劑還是斐林試劑,歸根結底都是二價銅與醛基在沸水浴加熱條件下反應而生成磚紅色的沉淀,兩者反應現(xiàn)象一樣,這就是二者的相同之處。